1. Шта је култура ћелија?
Ћелијска култура се односи на уклањање ћелија из животиња или биљака, а затим њихово узгајање у повољном вештачком окружењу.Ћелије се могу узети директно из ткива и разбити ензимским или механичким средствима пре култивисања, или могу бити изведене из успостављених ћелијских линија или ћелијских линија.
2. Шта је примарна култура?
Примарна култура се односи на фазу културе након што се ћелије одвоје од ткива и пролиферирају под одговарајућим условима док не заузму све доступне супстрате (тј. дођу до споја).У овој фази, ћелије морају бити субкултурисане преношењем у нови контејнер са свежим медијумом за раст како би се обезбедило више простора за наставак раста.
2.1 Ћелијска линија
Након прве субкултуре, примарна култура се назива ћелијска линија или субклон.Ћелијске линије изведене из примарних култура имају ограничен животни век (тј. ограничени су; видети доле), а како пролазе, доминирају ћелије са највећим капацитетом раста, што резултира одређеним степеном генотипа у популацији који је у складу са фенотипом.
2.2 Ћелијски сој
Ако је субпопулација ћелијске линије позитивно одабрана из културе клонирањем или неким другим методом, ћелијска линија би постала ћелијски сој.Ћелијски сојеви обично добијају додатне генетске промене након покретања родитељске линије.
3. Ограничене и континуиране ћелијске линије
Нормалне ћелије се обично деле само ограничен број пута пре него што изгубе способност размножавања.Ово је генетски условљен догађај који се зове старење;ове ћелијске линије се називају коначним ћелијским линијама.Међутим, неке ћелијске линије постају бесмртне кроз процес који се зове трансформација, који се може догодити спонтано или може бити изазван хемикалијама или вирусима.Када коначна ћелијска линија прође кроз трансформацију и добије способност да се дели на неодређено време, она постаје континуирана ћелијска линија.
4.Културно стање
Услови културе за сваку врсту ћелије су веома различити, али вештачко окружење за култивисање ћелија увек се састоји од одговарајуће посуде, која садржи следеће:
4.1 Супстрат или медијум за културу који обезбеђује есенцијалне хранљиве материје (аминокиселине, угљене хидрате, витамине, минерале)
4.2 Фактори раста
4.3 Хормони
4.4 Гасови (О2, ЦО2)
4.5 Регулисано физичко и хемијско окружење (пХ, осмотски притисак, температура)
Већина ћелија зависе од сидрења и морају се узгајати на чврстом или получврстом супстрату (адхерентна или једнослојна култура), док друге ћелије могу да расту плутајући у медијуму (култура суспензије).
5.Криопрезервација
Ако у субкултури има вишка ћелија, треба их третирати одговарајућим заштитним агенсом (као што је ДМСО или глицерол) и чувати на температури испод -130°Ц (криопрезервација) док не буду потребне.За више информација о субкултури и криопрезервацији ћелија.
6. Морфологија ћелија у култури
Ћелије у култури се могу поделити у три основне категорије на основу њиховог облика и изгледа (тј. морфологије).
6.1 Ћелије фибробласта су биполарне или мултиполарне, имају издужен облик и расту везане за супстрат.
6.2 Ћелије сличне епителу су полигоналне, правилније величине и причвршћене су за матрикс у дискретним листовима.
6.3 Ћелије сличне лимфобласту су сферне и обично расту у суспензији без везивања за површину.
7.Примена културе ћелија
Ћелијска култура је један од главних алата који се користе у ћелијској и молекуларној биологији.Пружа одличан модел система за проучавање нормалне физиологије и биохемије ћелија (као што су метаболичка истраживања, старење), ефеката лекова и токсичних једињења на ћелије, и мутагенезе и канцерогених ефеката.Такође се користи за скрининг и развој лекова и производњу великих размера биолошких једињења (као што су вакцине, терапеутски протеини).Главна предност коришћења ћелијске културе за било коју од ових примена је конзистентност и поновљивост резултата који се могу добити коришћењем серије клонираних ћелија.
Време објаве: 03.06.2019