1. Избор праве ћелијске линије
Када бирате одговарајућу ћелијску линију за свој експеримент, узмите у обзир следеће критеријуме:
а.Врсте: Ћелијске линије које нису људи и примате обично имају мање ограничења у погледу биолошке безбедности, али на крају ће ваш експеримент одредити да ли ћете користити културу одређене врсте.
б. Карактеристике: Која је сврха вашег експеримента?На пример, ћелијске линије изведене из јетре и бубрега могу бити погодније за испитивање токсичности.
ц. Ограничено или континуирано: Иако вам бирање између ограничене ћелијске линије може пружити више опција за изражавање исправне функције, непрекидне ћелијске линије је генерално лакше клонирати и одржавати.
д. Нормалне или трансформисане: Трансформисане ћелијске линије обично имају већу стопу раста и већу ефикасност сејања, континуиране су и захтевају мање серума у медијуму културе, али је њихов фенотип претрпео трајне промене кроз генетску трансформацију.
е. Услови и карактеристике раста: Који су ваши захтеви за брзину раста, густину засићења, ефикасност клонирања и способност раста суспензије?На пример, да бисте експримирали рекомбинантне протеине у високим приносима, можда ћете морати да изаберете ћелијске линије које имају брзе стопе раста и способност раста у суспензији.
ф.Други критеријуми: Ако користите ограничену ћелијску линију, да ли има довољно расположивих залиха?Да ли је ћелијска линија потпуно окарактерисана или морате сами да је проверите?Ако користите абнормалну ћелијску линију, да ли постоји еквивалентна нормална ћелијска линија која се може користити као контрола?Да ли је ћелијска линија стабилна?Ако не, колико је лако клонирати га и створити довољно замрзнутих залиха за ваш експеримент?
2. Набавите ћелијске линије
Можете направити сопствену културу од примарних ћелија, или можете изабрати да купите успостављене ћелијске културе од комерцијалних или непрофитних добављача (тј. банака ћелија).Реномирани добављачи обезбеђују висококвалитетне ћелијске линије које су пажљиво тестиране на интегритет и обезбеђују да култура не садржи загађиваче.Препоручујемо да не позајмљујете културе из других лабораторија јер постоји велики ризик од контаминације ћелијске културе.Без обзира на извор, молимо вас да проверите да ли су све нове ћелијске линије тестиране на контаминацију микоплазмом пре него што почнете да га користите.
Време поста: 01.02.2023